Molekulargenetische Analysen stellen einen unverzichtbaren Bestandteil in der Diagnostik und Verlaufsbeurteilung der ALL im Kindesalter dar.
Für die molekulargenetische Bestimmung der minimalen Resterkrankung (MRD) setzt das ALL-BFM Referenzlabor die quantitative real-time PCR (qPCR) ein. Diese Methode basiert auf den Nachweis von leukämiespezifischen DNA-Sequenzvarianten, chromosomalen Translokationen und genomischen Rearrangements und erlaubt es patientenspezifische Mutationen bei Diagnosestellung zu identifizieren und während des Therapieverlaufs zu überwachen.
Im ALL-BFM Referenzlabor werden nach genomischen Rearrangements in T-Zell Rezeptorgenen (TR) und Immunglobulingenen (Ig) gesucht (engl. screening). Im Therapieverlauf werden identifizierte Marker sowie identifizierte Translokationen des Gens KMT2A quantifiziert, um die Resterkrankung (auch MRD-Last genannt) zu überwachen.
Methoden
MRD Markerscreening
Immunglobulin-Gen-Rearrangements
Methode
PCR, Gel-Elektrophorese
Material
5-10 ml peripheres Blut (Heparin/EDTA) oder
5-10 ml Knochenmarkpunktat (Heparin/EDTA) oder
5-10 ml Pleuraerguss oder
Mindestens 8 µg DNA aus den oben genannten Matrices
Präanalytik
Das Probenmaterial darf bei Start der Methode nicht älter als 3-4 Tage sein. Zwingend die Verpackungsvorschriften beachten
Indikation
Identifikation und Charakterisierung klonaler Marker für eine spätere Analyse messbarer Resterkrankung (MRD) bei reifzelligen B-Zell-Neoplasien oder einer ALL.
T-Zell-Rezeptor-Gen-Rearrangements
Methode
PCR, Gel-Elektrophorese
Material
5-10 ml peripheres Blut (Heparin/EDTA) oder
5-10 ml Knochenmarkpunktat (Heparin/EDTA) oder
5-10 ml Pleuraerguss oder
Mindestens 8 µg DNA aus den oben genannten Matrices
Präanalytik
Das Probenmaterial darf bei Start der Methode nicht älter als 3-4 Tage sein. Zwingend die Verpackungsvorschriften beachten.
Indikation
Identifikation und Charakterisierung klonaler Marker für eine spätere Analyse messbarer Resterkrankung (MRD) bei reifzelligen T-Zell-Neoplasien oder einer ALL.
MRD Analyse
Klonspezifische Immunglobulin-Gen-Rearrangements
Methode
Realtime-PCR (qPCR)
Material
5-10 ml peripheres Blut (Heparin/EDTA) oder
5-10 ml Knochenmarkpunktat (Heparin/EDTA) oder
Mindestens 5 µg DNA aus den oben genannten Matrices
Präanalytik
Das Probenmaterial darf bei Start der Methode nicht älter als 3-4 Tage sein. Zwingend die Verpackungsvorschriften beachten.
Klonspezifische T-Zell-Rezeptor-Gen-Rearrangements
Methode
Realtime-PCR (qPCR)
Material
5-10 ml peripheres Blut (Heparin/EDTA) oder
5-10 ml Knochenmarkpunktat (Heparin/EDTA) oder
Mindestens 5 µg DNA aus den oben genannten Matrices
Präanalytik
Das Probenmaterial darf bei Start der Methode nicht älter als 3-4 Tage sein. Zwingend die Verpackungsvorschriften beachten.
KMT2A-Translokationen
Methode
Realtime-PCR (qPCR)
Material
5-10 ml peripheres Blut (Heparin/EDTA) oder
5-10 ml Knochenmarkpunktat (Heparin/EDTA) oder
Mindestens 5 µg DNA aus den oben genannten Matrices
Präanalytik
Das Probenmaterial darf bei Start der Methode nicht älter als 3-4 Tage sein. Zwingend die Verpackungsvorschriften beachten.
Ansprechpartnerin
Dr. med. Julia Alten
Labor Kontakt
| Tel. (MRD): | +49 (0) 431 500-20260 |
| Tel. (Laborleitung): | +49 (0) 431 500-20113 |
| Fax: | +49 (0) 431 500-20278 |